alcian-blue and Cardiomyopathies

To compare efficiency and specific features of transthyretin amyloid staining by different histological dyes and thus to assess their suitability for diagnostic purposes.. Samples of left and right heart ventricles were taken from patients over 70 years-old of both genders (n=10) with immunohistochemically verified transthyretin amyloidosis (ATTR). All samples were stained with Congo red, Alcian blue, toluidine blue and methylene violet.. Specificity and sensitivity of Congo red staining was comparable to those of immunohistochemical staining. For verification of amyloid presence after Congo red staining one could use fluorescent microscopy instead of polarization microscopy. It allows a more accurate diagnosis of amyloidosis. Confocal microscopy with spectral unmixing improves detection sensitivity of amyloid by elimination of background fluorescence of muscle tissue and autofluorescence of lipofuscin. Alcian blue staining gives the same result as Congo red. In addition, its less labor-intensive and free of false-positive and false-negative results caused by final processing of slide preparation. Toluidine blue and methylene violet develop metachromatic staining upon binding to transthyretin fibrils, likely due to specific biochemical features of these fibrils.. The most reliable method for histochemical diagnosis of ATTR is the Congo red staining with subsequent analysis using fluorescence or confocal microscopy. For diagnostic screening, the use of Sodium sulphate-Alcian blue staining method is highly promising. Metachromatic stains are less effective for ATTR diagnosis.. Цель. Изучить особенности окраски транстиретинового амилоида разными гистохимическими красителями и оценить эффективность их использования для диагностических целей. Материалы и методы. Материалом для исследования послужили образцы миокарда левого и правого желудочка лиц обоих полов в возрасте старше 70 лет (n=10) с иммуногистохимически верифицированным транстиретиновым амилоидозом. Препараты всех отобранных случаев были окрашены Конго красным, альциановым синим, толуидиновым синим и метиловым фиолетовым. Результаты. В случае транстиретинового амилоидоза миокарда окраска Конго красным по чувствительности и специфичности выявления амилоида сопоставима с иммуногистохимической реакцией. Для верификации присутствия амилоида вместо поляризационной микроскопии может быть использован метод флуоресцентной микроскопии, который дает возможность более надежно определить природу конгофильных скоплений. Применение метода конфокальной микроскопии и функции спектрального разделения позволяет усилить контрастность выявления амилоида за счет элиминирования фоновой флуоресценции мышечной ткани и автофлуоресценции липофусцина. Метод окраски альциановым синим по чувствительности и специфичности обнаружения амилоида сопоставим с Конго красным. При этом он менее трудоемок и позволяет избежать ложноположительных и ложноотрицательных результатов, обусловленных особенностями финальной обработки препаратов. Толуидиновый синий и метиловый фиолетовый проявляют метахроматическое окрашивание при связывании с транстиретиновым амилоидом, что может быть обусловлено биохимическими особенностями амилоида этого типа. Заключение. Наиболее надежным методом гистохимической диагностики транстиретинового амилоидоза является окраска Конго красным с последующим исследованием препаратов методами флуоресцентной или конфокальной микроскопии. В качестве скринингового метода в диагностических целях может быть применена окраска альциановым синим. Метахроматические красители менее эффективны для диагностики транстиретинового амилоидоза миокарда.

Topics: Aged; Alcian Blue; Amyloid; Amyloid Neuropathies, Familial; Cardiomyopathies; Coloring Agents; Congo Red; Female; Humans; Lipofuscin; Male; Prealbumin; Tolonium Chloride